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十大网赌网址石彦课题组在《Nature Communications》发文揭示固体颗粒的吞噬新机制和基础免疫信号的可能起源 时间:2018-10-22

10月8日,十大网赌网址研究组倪建全在《Nature Communications》发表了题为“果蝇低毒性的多效靶向转基因RNAi技术”的研究论文,报道了果蝇的高效率,A独特的新一代转基因干扰技术,首次在个体水平上同时调节多个基因的表达。

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果蝇转基因干扰技术操作简单,适合大规模筛选。在Gal4/UAS系统的帮助下,它可以实现靶基因在特定组织,器官和发育阶段的敲低表达,并成为研究基因功能的最常用方法。 。 Gal4/UAS系统通过使用特定的调节序列来激活Gal4因子的特异性表达,从而激活响应元件UAS并最终调节目的基因(图1)。这种方法允许靶基因在UAS发夹系中保持沉默,从而有利于维持生产线。

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图1. Gal4/UAS系统如何工作

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然而,随着使用的深入,现有转基因干扰技术的一些缺点逐渐暴露出来,如基因启动子背景中shRNA的表达引起的假阳性结果,由于低效敲低引起的假阴性结果。高度表达的基因,并且不可能同时敲除多个目的基因的表达。

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为了提高转基因干扰技术的效率,特异性和多功能性,我们通过替换启动子和添加可以同时表达多个shRNA的接头,独立探索和转化新一代转基因干扰技术。与以往的转基因干扰技术相比,干扰效率高,毒副作用小,特异性强,能有效敲除高表达基因,并首次在个体水平上同时调控多个基因(图2 3)这也为研究蛋白质复合物和功能冗余基因的功能提供了强大的技术手段。利用新一代转基因干扰技术,我们构建了一个转基因干扰种质库,与人类疾病相关基因具有高度同源性,包括各种细胞信号通路基因,RNA结合蛋白基因和蛋白激酶基因。

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图2.pNP系统可以有效地敲除果蝇体细胞和生殖细胞中目的基因的表达。

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图3.使用pNP系统可以同时敲除多个基因。

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使用GMR-Gal4敲低chm,Tip60和Gcn5基因或chm-Tip60不能产生明显的表型,只有敲除chm的三个基因,Tip60和Gcn5同时会导致肿瘤样表型。

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十大网赌网址倪建全教授是本文的作者。乔欢欢博士,博士生命科学联合中心的学生,十大网赌网址的王方博士和徐荣刚博士,以及十大网赌网址博士后研究员倪建全博士是共同的第一作者。该研究由国家自然科学基金和科技部资助。

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◎纸链接:

链接到论文:https://www.nature.com/articles/s41467-018-06537-y

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